کیت آزمایش کولستین ELISA بازتولید پذیری بالا حساسیت بالا

اطمینان حاصل کنید که نمونه ها به درستی نگهداری می شوند. به طور کلی، نمونه ها باید در ۲ تا ۴ درجه سانتیگراد برای بیش از ۱ تا ۲ روز در یخچال نگهداری شوند.

نمونه ها را به حداقل -20°C یخ زده و اگر نیاز به نگهداری طولانی تر داشته باشند. نمونه های منجمد شده را می توان در دمای اتاق تخلیه کرد.️C / 68 ¢ 77️F) یا در یخچال قبل از استفاده.

1آماده سازی 1X Colistin Extraction Buffer I:

یک حجم 10X Colistin Extraction Buffer I را با 9 حجم آب تقطیر شده مخلوط کنید.

2آماده سازی 1X Colistin Extraction Buffer II برای استخراج گوشتیک حجم 6X Colistin Extraction Buffer II را با 5 حجم آب تقطیر شده مخلوط کنید.

3آماده سازی 3X Colistin Extraction Buffer II برای استخراج خوراک و خرچنگ3 حجم 6X Colistin Extraction Buffer II را با 3 حجم آب تقطیر شده مخلوط کنید.

گوشت(گوشت گاو، گوشت خوک و مرغ)

1چربی از گوشت برداشته شود و مقدار معقولی از نمونه با مخلوط کننده مناسب همگن شود.

2۱ گرم از نمونه گوشت همگن شده را وزن کنید، ۳.۵ میلی لیتر ۱X Colistin Extraction Buffer I و ۵۰۰ لیتر ۱X Colistin Extraction Buffer II را اضافه کنید، ۳ میلی لیتر گرداب n-hexane را اضافه کنید یا ۳ دقیقه تکان دهید.

3برای ۱۰ دقیقه در ۴۰۰۰ x g در دمای اتاق (۲۰️C / 68 ¢ 77️F) 4. لایه n-hexane را جذب کنید و از بین ببرید، سپس 500 لیتری از supernatant را به یک لوله جدید که حاوی 200 لیتری از 10X Colistin Extraction Buffer است، انتقال دهید.200 لیتری از 100٪ اتانول و 100 لیتری از Colistin Balance Buffer.

5. گرد و غبار يا تکان دادن براي 30 ثانيه با حداکثر سرعت

6در آزمایش الیزا از 75 لیتر در هر چاه استفاده کنید.

توجه: ضخیم کننده:10 پودر گوشت

1یک مقدار معقول از نمونه را با یک مخلوط کننده مناسب همگن کنید.

20.5 گرم از نمونه همگن شده را وزن کنید، 3.5 میلی لیتر 1X Colistin Extraction Buffer I و 500 لیتر 1X Colistin Extraction Buffer II را اضافه کنید، 3 میلی لیتر گرداب n-hexane را اضافه کنید یا برای 3 دقیقه تکان دهید.️آماده سازی نمونه

N3برای ۱۰ دقیقه در ۴۰۰۰ x g در دمای اتاق (۲۰️C / 68 ¢ 77️F).

4لایه n-hexane را جذب کنید و از بین ببرید، سپس 500 لیتری از supernatant را به یک لوله جدید که حاوی 200 لیتری از 10X Colistin Extraction Buffer است، انتقال دهید.200 لیتری از 100٪ اتانول و 100 لیتری از Colistin Balance Buffer.

5. گرد و غبار يا تکان دادن براي 30 ثانيه با حداکثر سرعت

6در آزمایش الیزا از 75 لیتر در هر چاه استفاده کنید.

توجه: فاکتور رقیق کردن: 16

1یک مقدار معقول از نمونه را با یک مخلوط کننده مناسب همگن کنید.

20.5 گرم از نمونه همگن شده را وزن کنید، 2 میلی لیتر 0.1M HCl و 2 میلی لیتر n-hexane را اضافه کنید و با گرد و غبار در سرعت بالا برای 3 دقیقه مخلوط کنید.

3برای ۱۰ دقیقه در ۴۰۰۰ x g در دمای اتاق (۲۰️C / 68 ¢ 77️F) 4. جذب و دور انداختن لایه n-هکسان، سپس انتقال 200uL از supernatant به یک لوله سانتریفیوژ تمیز، اضافه 150uL از 1×Colistin Extraction Buffer I، و با سرعت بالا برای 30 ثانیه تکان دهید.

5در آزمایش الیزا از 75 لیتر در هر چاه استفاده کنید.

توجه: فاکتور رقیق کردن:8.75 ماهی/کربلا

1یک مقدار معقول از نمونه را با یک مخلوط کننده مناسب همگن کنید.

2۱٫۰ گرم از نمونه گوشت همگن شده را وزن کنید، ۳٫۵ میلی لیتر 1X Colistin Extraction Buffer I و ۵۰۰ لیتر ۳X Colistin Extraction Buffer II را اضافه کنید، ۳ میلی لیتر گرداب n-hexane را اضافه کنید یا برای ۳ دقیقه تکان دهید.

3برای ۱۰ دقیقه در ۴۰۰۰ x g در دمای اتاق (۲۰️C / 68 ¢ 77️F) 4. لایه n-hexane را جذب کنید و از بین ببرید، سپس 200 لیتری از supernatant را به یک لوله جدید حاوی 300 لیتری آب تقطیر شده، 200 لیتری از 10X Colistin Extraction Buffer منتقل کنید.200 لیتری از 100٪ اتانول و 100 لیتری از Colistin Balance Buffer.

5. گرد و غبار يا تکان دادن براي 30 ثانيه با حداکثر سرعت

6در آزمایش الیزا از 75 لیتر در هر چاه استفاده کنید.

توجه: فاکتور رقیق کردن:25