کیت آزمایش 96T High Recovery Dibutylphthalate DBP ELISA برای روغن کلم روغن سویا روغن بادام زمینی روغن ذرت و روغن مخلوط

واکنش ها و ظروف مورد نیاز اما ارائه نشده عبارتند از:
دی متیل سولفوکسید، برای تحلیل خالص
(2) آب دیونیزه شده
(3) لوله سانتریفیوژ شیشه ای 5 میلی لیتر، شیرینی شیشه ای 2 میلی لیتر

روغن غذایی برای حیوانات و گیاهان
1.5±0.01g از نمونه روغن را در یک لوله سانتریفیوژ شیشه ای 5 میلی لیتر وزن کنید، 1.5 میلی لیتر دی متیل سولفوکسید را اضافه کنید و برای 3 دقیقه تکان دهید.
2) سانتریفیوژ با سرعت 4000 دور در دقیقه برای 1 دقیقه
3) لایه مایع بالایی را دور بریزید، 1 میلی لیتر از لایه پایین را بردارید و آن را به لوله تصفیه اضافه کنید، سپس 0.2 میلی لیتر از واکنش دهنده تصفیه DBP A را اضافه کنید و برای 1 دقیقه تکان دهید.
4) سانتریفیوژ با سرعت 4000 دور در دقیقه برای 1 دقیقه
5) 0.1mL از supernatant را بردارید و آن را به 0.9mL از خفیف کننده نمونه اضافه کنید، سپس برای 15 ثانیه گرداب کنید.
فاکتور رقیق سازی نمونه: 10

2.مراحل عملیاتی
قبل از آزمایش، لطفا کیت آزمایش را در دمای 2-8 درجه سانتیگراد از یخچال خارج کنید و آن را در دمای داخلی 20-28 درجه سانتیگراد برای بیش از 1 ساعت تعادل دهید!
آماده سازی واکنش دهنده
محلول شستشو (1×) : یک حجم 20× محلول شستشو متمرکز را بگیرید، 19 حجم آب دیونیزه شده یا آب تقطیر شده را اضافه کنید، به خوبی مخلوط کنید و کنار بگذارید. آن را می توان به صورت مورد نیاز آماده کرد
1) مقدار مناسبی از نوارها را بیرون بیاورید و بقیه را به کیسه فیلم آلومینیومی برگردانید.
2) 150μL از واکنش دهنده فعال سازی DBP را به میکروول اضافه کنید.
3) صفحه را بپوشانید، بگذارید در 20-28 درجه سانتیگراد برای 5 دقیقه باقی بماند، سپس آن را بریزید و مایع را در سوراخ ها تا حد ممکن خشک بر روی یک پارچه صفحه قرار دهید.
4) 50μL از استاندارد/نمونه را به میکروول های مربوطه به ترتیب اضافه کنید. 50μL از آنزیم کنژوگیت و 50μL از آنتی بادی را به تمام میکروول ها اضافه کنید. به آرامی به قاب تخته ضربه بزنید.
5) صفحه را بپوشانید و در دمای 20 تا 28 درجه سانتیگراد برای 20 دقیقه مهار کنید. مایع را در میکروپوره ها بریزید.
6) میکروپورس ها را با محلول شوینده پر کنید، 15 ثانیه خیس کنید، سپس آن را بریزید. این فرآیند را 4 بار برای 5 بار تکرار کنید.و مایع را در سوراخ تا جایی که ممکن است روی پارچه راکت خشک کنید;
7) 100μL از بستر را به میکروول اضافه کنید، به آرامی روی رک صفحه ضربه بزنید، نوار صفحه را بپوشانید و در 20-28 ° C برای 10 دقیقه حشره گیر کنید.
8) پیچ صفحه را بردارید، مایع را نریزید، مستقیما 100μL محلول توقف را به میکروول اضافه کنید، به آرامی به قاب صفحه ضربه بزنید و خواندن را در طول موج 450/630nm بگیرید.